近日，农业农村部发布了五项与奶业相关的标准，其中NY/T4630—2025《牛乳及其制品中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的测定 高效液相色谱法》将于2025年5月1日正式实施。随着人们生活水平的提升，奶制品在中国的消费量迅速增加。然而，在婴幼儿中，牛乳蛋白过敏症（CMA）的发生率相对较高，并且呈现逐年上升的趋势。研究表明，婴幼儿主要对β-乳球蛋白和α-乳白蛋白过敏。因此，开发高特异性、高灵敏度、快速且准确的检测方法，将有助于保护CMA患儿的健康。

本研究依照上述标准，采用高性能尺寸排阻色谱柱TSKgel UP-SW3000（46mm ID×30cm, 2μm）建立牛乳及其制品中β-乳球蛋白和α-乳白蛋白的检测方法。样品预处理方面，针对高温杀菌牛乳和灭菌牛乳均进行了平行实验。具体步骤包括：称取125g样品（精确至0.1mg）于烧杯中，加入10mL水，充分混匀后使用盐酸溶液调节pH至4.60±0.05。随后转移至25mL容量瓶中，加水定容并混匀。将混合液转移至离心管中，静置2小时，再以12000r/min的速度离心10分钟。于5mL容量瓶中准确移取上清液1mL，并加入3mL盐酸胍缓冲溶液及50µL β-巯基乙醇，最后以盐酸胍缓冲溶液定容，混匀后在室温下静置2小时，摇匀后过滤，即为待测样液。

在实验条件方面，使用的色谱柱为TSKgel UP-SW3000，流动相为盐酸胍缓冲溶液，流速设定为0.18mL/min，检测波长为UV@280nm，进样量为10µL。

研究结果表明，使用TSKgel UP-SW3000色谱柱成功建立了牛乳及其制品中β-乳球蛋白和α-乳白蛋白的检测方法，β-乳球蛋白与α-乳白蛋白的分离度超过15。通过以β-乳球蛋白和α-乳白蛋白的浓度为横坐标、色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得出的相关系数均大于0.99。这一检测方法具有省时及高灵敏度的优势，将为有关牛乳过敏研究及食品安全监测提供重要的技术支持。

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