尊龙凯时提供了一种高效的方法用于提取大鼠原代脂肪间充质干细胞（SD大鼠）。以下为实验材料准备和操作步骤。

实验材料准备

首先，选择约2周龄或体重在200克左右的SD大鼠。准备必要的无菌器械，包括镊子、眼科直剪、眼科弯剪和磁珠等。同时，准备5mL注射器、022μm过滤器、泡沫板和图钉用于固定大鼠。此外，75%乙醇用于器械和实验环境的消毒。确保预冷的无菌PBS水及无菌离心管（15mL和50mL）、细胞筛以及无菌培养瓶等材料齐全。培养基方面，可选用SD大鼠脂肪间质干细胞的完全培养基。

实验操作步骤

将所需实验材料置于超净工作台，并进行紫外消毒30分钟。配制约5mL的0.1%Ⅰ型胶原酶，并通过过滤进行除菌。随后，处死大鼠后将其浸泡在75%酒精中2-3分钟，接着在超净工作台固定于泡沫板上。

仔细剪开大鼠的腹股沟区域皮肤以暴露出脂肪组织，并小心地剪取脂肪组织，放入PBS中以避免损伤血管。用PBS对脂肪组织进行清洗，剔除多余的血管和淋巴结。将脂肪组织剪碎至适宜的大小（如2mm×2mm），加入胶原酶于37℃条件下消化，每隔5分钟轻轻震荡一次或持续搅拌。

待消化完成后，将细胞悬液转移至离心管中进行离心，弃去上层脂滴泡沫及上清液后，用培养基重悬沉淀。将细胞悬液再进行过滤，随后再一次离心并弃去上清，最后用培养基重悬细胞，并接种至培养瓶中。将培养瓶放置于37℃、5% CO2的培养箱中进行培养。

注意事项

在整个实验过程中，保持无菌操作至关重要，以避免细胞污染。脂肪组织的剪取与清洗需特别小心，以防损伤细胞或引入杂质。消化过程中需严格控制消化时间和温度，避免过度消化导致细胞的损伤。另外，离心和过滤时需轻柔操作，以防细胞损失或破裂，确保获得高质量的干细胞。

通过这一系列精细的操作步骤，尊龙凯时致力于为研究人员提供优质的脂肪间充质干细胞提取方法，促进生物医学的进一步发展。